1. Tujuan: Prosedur iki nduweni tujuan kanggo nyedhiyakake prosedur standar kanggo operasi aseptik lan perlindungan kamar steril.
2. Cakupan aplikasi: laboratorium uji coba biologis
3. Penanggung Jawab: Penguji Supervisor QC
4. Definisi: Ora Ana
5. Pancegahan keamanan
Nindakake operasi aseptik kanthi ketat kanggo nyegah kontaminasi mikroba; operator kudu mateni lampu UV sadurunge mlebu ruangan steril.
6. Prosedur
6.1. Kamar steril kudu dilengkapi kamar operasi steril lan kamar penyangga. Kebersihan kamar operasi steril kudu tekan kelas 10000. Suhu njero ruangan kudu dijaga ing 20-24°C lan kelembapan kudu dijaga ing 45-60%. Kebersihan bangku sing resik kudu tekan kelas 100.
6.2. Kamar steril kudu dijaga supaya tetep resik, lan dilarang banget numpuk rereged kanggo nyegah kontaminasi.
6.3. Nyegah kontaminasi kabeh peralatan sterilisasi lan media kultur kanthi ketat. Piranti sing wis tercemar kudu mandheg nggunakake.
6.4. Kamar steril kudu dilengkapi disinfektan konsentrasi kerja, kayata larutan kresol 5%, alkohol 70%, larutan klormetionin 0,1%, lan liya-liyane.
6.5. Kamar steril kudu disterilisasi kanthi rutin lan diresiki nganggo disinfektan sing cocog kanggo mesthekake yen kebersihan kamar steril wis memenuhi syarat.
6.6. Kabeh instrumen, piranti, piring, lan barang liyane sing kudu digawa menyang kamar steril kudu dibungkus rapet lan disterilisasi nganggo cara sing cocog.
6.7. Sadurunge mlebu kamar steril, staf kudu ngumbah tangane nganggo sabun utawa disinfektan, banjur ganti nganggo sandhangan kerja khusus, sepatu, topi, masker lan sarung tangan ing kamar buffer (utawa ngusap tangane maneh nganggo etanol 70%) sadurunge mlebu kamar steril. Nindakake operasi ing kamar bakteri.
6.8. Sadurunge nggunakake kamar steril, lampu ultraviolet ing kamar steril kudu diuripake kanggo iradiasi lan sterilisasi luwih saka 30 menit, lan bangku sing resik kudu diuripake kanggo nyebul udara bebarengan. Sawise operasi rampung, kamar steril kudu diresiki kanthi tepat wektu banjur disterilisasi nganggo sinar ultraviolet suwene 20 menit.
6.9. Sadurunge pamriksaan, kemasan njaba sampel uji kudu dijaga tetep utuh lan ora kena dibukak kanggo nyegah kontaminasi. Sadurunge pamriksaan, gunakake bal katun alkohol 70% kanggo ndisinfeksi permukaan njaba.
6.10. Sajrone saben operasi, kontrol negatif kudu ditindakake kanggo mriksa keandalan operasi aseptik.
6.11. Nalika nyerep cairan bakteri, sampeyan kudu nggunakake bal sedotan kanggo nyerep. Aja ndemek sedotan langsung nganggo cangkem.
6.12. Jarum inokulasi kudu disterilisasi nganggo geni sadurunge lan sawise saben panggunaan. Sawise adhem, kultur bisa diinokulasi.
6.13. Sedotan, tabung reaksi, cawan petri, lan piranti liyane sing ngemot cairan bakteri kudu direndhem ing ember sterilisasi sing ngemot larutan Lysol 5% kanggo disinfeksi, banjur dicopot lan dibilas sawise 24 jam.
6.14. Yen ana cairan bakteri sing tumpah ing meja utawa lantai, sampeyan kudu langsung ngecorake larutan asam karbol 5% utawa Lysol 3% ing area sing terkontaminasi paling ora 30 menit sadurunge diobati. Nalika sandhangan kerja lan topi terkontaminasi cairan bakteri, kudu langsung dicopot lan dicuci sawise sterilisasi uap tekanan tinggi.
6.15. Kabeh barang sing ngandhut bakteri urip kudu didisinfeksi sadurunge dibilas nganggo kran. Dilarang banget ngrusak saluran pembuangan.
6.16. Cacahing koloni ing kamar steril kudu dipriksa saben wulan. Kanthi meja resik mbukak, jupuk sawetara cawan petri steril kanthi diameter njero 90 mm, lan suntikake kanthi aseptik udakara 15 ml medium kultur agar nutrisi sing wis dilelehke lan didinginkan nganti udakara 45°C. Sawise padhet, lebokake kanthi posisi walik ing suhu 30 nganti 35°C. Inkubasi sajrone 48 jam ing inkubator ℃. Sawise mbuktekake sterilitas, jupuk 3 nganti 5 piring lan lebokake ing sisih kiwa, tengah, lan tengen posisi kerja. Sawise mbukak tutup lan mbukak sajrone 30 menit, lebokake kanthi posisi walik ing inkubator 30 nganti 35°C sajrone 48 jam lan copot. priksa. Cacahing rata-rata bakteri macem-macem ing piring ing area resik kelas 100 ora kena ngluwihi 1 koloni, lan cacahing rata-rata ing kamar resik kelas 10000 ora kena ngluwihi 3 koloni. Yen watesan kasebut ngluwihi, kamar steril kudu didisinfeksi kanthi tliti nganti inspeksi bola-bali memenuhi syarat.
7. Deloken bab (Metode Inspeksi Sterilisasi) ing "Metode Inspeksi Higienis Obat" lan "Praktik Operasi Standar China kanggo Inspeksi Obat".
8. Departemen Distribusi: Departemen Manajemen Mutu
Pandhuan teknis kamar resik:
Sawise entuk lingkungan steril lan bahan steril, kita kudu njaga kahanan steril supaya bisa nyinaoni mikroorganisme tartamtu sing wis dikenal utawa nggunakake fungsine. Yen ora, macem-macem mikroorganisme saka njaba bisa gampang nyampur. Fenomena nyampur mikroorganisme sing ora relevan saka njaba diarani bakteri sing ngontaminake ing mikrobiologi. Nyegah kontaminasi minangka teknik penting ing karya mikrobiologi. Sterilisasi lengkap ing sisih siji lan pencegahan kontaminasi ing sisih liyane minangka rong aspek teknik aseptik. Kajaba iku, kita kudu nyegah mikroorganisme sing ditliti, utamane mikroorganisme patogen utawa mikroorganisme rekayasa genetik sing ora ana ing alam, supaya ora lolos saka wadhah eksperimen menyang lingkungan njaba. Kanggo tujuan kasebut, ing mikrobiologi, ana akeh langkah.
Kamar steril biasane kamar cilik sing digawe khusus ing laboratorium mikrobiologi. Bisa digawe nganggo lembaran lan kaca. Areane ora kena kegedhen, udakara 4-5 meter persegi, lan dhuwure udakara 2,5 meter. Kamar buffer kudu digawe ing njaba kamar steril. Lawang kamar buffer lan lawang kamar steril ora kena madhep arah sing padha supaya aliran udara ora nggawa bakteri liyane. Kamar steril lan kamar buffer kudu kedap udara. Peralatan ventilasi njero ruangan kudu duwe piranti filtrasi udara. Lantai lan tembok kamar steril kudu alus, angel nampung rereget lan gampang diresiki. Permukaan kerja kudu rata. Kamar steril lan kamar buffer dilengkapi lampu ultraviolet. Lampu ultraviolet ing kamar steril jarake 1 meter saka permukaan kerja. Staf sing mlebu kamar steril kudu nganggo sandhangan lan topi sing wis disterilisasi.
Saiki, kamar steril umume ana ing pabrik mikrobiologi, dene laboratorium umum nggunakake bangku resik. Fungsi utama bangku resik yaiku nggunakake piranti aliran udara laminar kanggo mbusak macem-macem bledug cilik kalebu mikroorganisme ing permukaan kerja. Piranti listrik iki ngidini udara ngliwati filter hepa banjur mlebu ing permukaan kerja, saengga permukaan kerja tansah dijaga ing sangisore kontrol udara steril sing mili. Kajaba iku, ana tirai udara kecepatan tinggi ing sisih sing cedhak karo njaba kanggo nyegah udara bakteri eksternal mlebu.
Ing panggonan sing kahanane angel, kothak steril kayu uga bisa digunakake minangka gantine bangku sing resik. Kothak steril iki nduweni struktur sing prasaja lan gampang dipindhah. Ana rong bolongan ing ngarep kothak, sing ditutupi lawang push-pull nalika ora digunakake. Sampeyan bisa ngulurake tangan nalika operasi. Bagean ndhuwur ngarep dilengkapi kaca kanggo nggampangake operasi internal. Ana lampu ultraviolet ing njero kothak, lan piranti lan bakteri bisa dilebokake liwat lawang cilik ing sisih.
Teknik operasi aseptik saiki ora mung nduweni peran penting ing riset lan aplikasi mikrobiologi, nanging uga digunakake sacara wiyar ing pirang-pirang bioteknologi. Contone, teknologi transgenik, teknologi antibodi monoklonal, lan liya-liyane.
Wektu kiriman: 06-Mar-2024